TESTELE IMUNOCHIMICE

TESTELE IMUNOCHIMICE

Imunoelectroforeza

Este o migrare in camp electric combinat cu o reactie imuna antigen-anticorp (Ag-Ac).

Am complex cu multe proteine ce au rol de antigeni = plasma umana . Pe o placa cu gel de agaroza se stanteaza un canal central dreptunghiular. Lasam ca antigenii sa difuzeze in gel prin electroforeza simpla, apoi stantam in fata canalului un godeu cu anticorpi (mai multe tipuri de anticorpi - sau unul singur - ser monospecific). Se continua electroforeza astfel incat antigenele migrate acum se orienteaza spre anticorpii din jur care si ei migreaza. La locul de intalnire apar arcuri de precipitare .

Este o reactie de precipitare antigen-anticorp in gel.

Fiecare arc de precipitare corespunde unei anumite proteine din complexul pe care il cautam

Exista rigle pe care sunt desenate arcurile de precipitare normale care se suprapun pe placa si vedem daca arcurile obtinute sunt normale, mai mari sau mai mici.

Este o reactie calitativa si are o durata de lucru mare : 24-72 de ore

Zona albumine si alfa1 gamaglobuline - aici migreaza :

w        Prealbumina,

w        Albumina,

w        Alfa1-antitripsina,

w        Alfa1-glicoproteina acida si

w        Componente ale complementului : C5; si altele :

w        Alfa1-fetoproteina - proteina sintetizata fetal, la adult exista in concentratii foarte mici in mod fiziologic, patologic in carcinomul hepato-celular creste mult sinteza acestor proteine, ea fiind utila pentru diagnosticul diferential dintre un carcinom primar hepatic si unul secundar - de metastaza

w        Protrombina.

Zona alfa2 - migreaza :

w        Haptoglobina - fixeaza globina in sange, globina aflata in cantitati foarte mici datorita hemolizei intravasculare - e fiziologica in cantitati mici; numai cand hemoliza intravenoasa e suficient de puternica apare hematuria

w        Ceruloplastina - proteina transportatoare a cuprului - absenta congenitala a ei da degenerescenta hepatolenticulara sau boala Wilson

w        Alfa2 - macroglobulina

w        Colinesteraza nespecifica

w        Alfa2 - antitrombina

w        Plasminogenul

w        Transcortina - transporta cortizolul plasmatic

w        Eritropoietina

w        Componentele C1,C4,C6,C9 ale complementului

w        Lipoproteine migreaza alaturi de proteine

Zona beta si gama - aici migreaza :

w        Transferina - e o beta-globulina

w        Imunoglobulinele - cele 5 tipuri

w        Lizozim

w        Beta-lipoproteinele

Electroimunodifuzia

Este o reactie antigen-anticorp desfasurata in gel in prezenta campului electric. In gel stantam 2 godeuri : in primul punem serul de la un bolnav de la care inspectam o anume proteina (este antigenul) iar in al doilea godeu punem imunoserul specific.

Daca antigenul e in ser, intre cele 2 godeuri apare o linie de precipitare, iar daca nu corespunde serul cu anticorpul aceasta linie nu apare. Sunt posibile de foarte multe ori reactii false (cand serul este foarte bogat in lipide - ele precipita si apare o linie falsa) ; posibilitate de contaminare bacteriologica.

Imunodifuzia radiara simpla (IDRS)

Este o reactie cantitativa.

Pe placa cu gel de agaroza turnam si serul cu anticorpii - stim cantitatea de ser si concentratia de anticorpi.

Stantam la mijloc un godeu in care se pune serul bolnavului, apoi se conecteaza la curent. Curentul electric si datorita faptului ca anticorpii sunt peste tot in gel apare un inel de precipitare al carui diametru este direct proportional cu concentratia de antigen (care se cunoaste, dar trebuie doar sa-l dozam). Mai e un inel de precipitare standard in functie de concentratia si de diametrul - se face regula de 3 simpla

Buletine de analiza

Buletin 1

Concluzii : o reactie inflamatorie acuta determinata de o infectie streptococica - rezulta ca e o glomerulonefrita . Glomerulonefrita da mereu hematurie si sindrom nefrotic.

Buletin 2

Concluzie : Infarct miocardic in primele 3 zile.

Buletin 3

Concluzie : Pancreatita acuta la inceput pentru ca a inceput sa creasca alfa1 si alfa2. Se instaleaza stare de soc cu colaps, pentru ca scade tensiunea arteriala.

Buletin 4

Concluzie : Hepatita virala acuta

Buletin 5

Concluzie : Hepatita cronica forma agresiva, poate fi si un inceput de ciroza.

Buletine de analiza

Buletin 1

Concluzie : Icter colestatic. In obstructii biliare apare inflamatia acuta in arborele biliar, ce da colecistitele acute sau angiocolite , boli ce evolueaza cu un tablou clinic foarte grav. Staza biliara favorizeaza dezvoltarea germenilor din tubul digestiv.

Buletin 2

Concluzie : O ciroza la un stadiu avansat. 

Buletin 3

Concluzie : Lupus eritematos sistemic, este o vasculita autoimuna ce sintetizeaza autoanticorpi fata de structurile vasculare.

Anticorpii antinucleari :

• Anticorpi anti-ADN
• Anticorpi anti-ARN
• Anticorpi anti-proteine histonice

Acesti anticorpi se pun in evidenta prin reactia de imunofluorescenta si dau imunofluorescenta "in tabla de sah".

Sindromul anemic in lupus - glomerulo-nefrita apare obligatoriu (cu cat apare mai devreme, speranta de viata este mai mica). Glomerulo-nefrita este insotita intotdeauna de hematurie.

Buletin 4

Concluzie : Poliartrita reumatoida : sunt anticorpi foarte ciudati, anti - anticorpi proprii: Ig impotriva Ig normale - componentele Ag sunt Ig Normale. Reactiile sunt modificari la nivelul articulatiilor.